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病毒RNA純化試劑盒實(shí)驗(yàn)案例

作者:新景實(shí)驗(yàn)室
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一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

檢測(cè)Simgen 病毒RNA純化試劑盒分離純化病毒RNA的效果。

二、實(shí)驗(yàn)步驟:

1.使用Simgen 病毒RNA純化試劑盒從HCV血清中提取RNA(具體實(shí)驗(yàn)步驟詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū))將提取的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄及PCR擴(kuò)增。

2.使用傳統(tǒng)Trizol法從HCV血清中提取RNA將提取的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄及PCR擴(kuò)增。

三、實(shí)驗(yàn)樣本:

100μl,5×105 copies/mlHCV血清。

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

simgen-病毒RNA純化試劑盒-實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖

曲線1Simgen病毒RNA純化試劑盒從100 μl5×105 copies/mlHCV血清中提取的RNA作為模板檢測(cè)HCV所獲得的擴(kuò)增曲線(RT-PCR一步法,50 μl擴(kuò)增體系中加入25 μl純化的RNA
曲線2用傳統(tǒng)的Trizol法(添加糖原助沉)從100 μl同一5×105 copies/mlHCV血清中提取的RNA作為模板檢測(cè)HCV所獲得的擴(kuò)增曲線(RT-PCR一步法,50 μl擴(kuò)增體系中加入全部純化的RNA

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)論:

1.根據(jù)上圖可知,使用Simgen 病毒RNA純化試劑盒從HCV血清中提取RNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄后成功擴(kuò)增出曲線,證明病毒總RNA試劑盒提取的RNA能夠滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求。

2.根據(jù)上圖可知,使用Simgen 病毒RNA純化試劑盒從HCV血清中提取RNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄后擴(kuò)增的曲線,較使用傳統(tǒng)Trizol法,PCR靈敏度更高。